B7.1和B7.2基因真核表达载体的构建及在肝癌细胞中表达的实验研究 

目的 构建含鼠源性B7 1和B7 2真核表达载体体系 ,研究其在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达的方法。方法 将目的基因全长cDNA分别亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得B7 1和B7 2正向单拷贝插入重组子PCI neo B7 1和PCI neo B7 2 ,采用酶切法和测序法鉴定。采用阳离子...
《中华肝胆外科杂志》  2004年 第03期 下载次数(113)| 被引次数(4)

4-1BBL基因真核表达载体构建及在肝癌细胞中表达的研究 

目的 研究含鼠源性 4 1BBL真核表达载体体系的构建及其在大鼠肝细胞癌 (HCC)细胞系CBRH7919中获得稳定、高效表达的方法。方法 将 4 1BBL全长cDNA亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得 4 1BBL定向插入重组子PCI neo 4 1BBL ,采用酶切法和测序法鉴定。用阳离子脂质体将...
《中华肿瘤杂志》  2003年 第04期 下载次数(167)| 被引次数(5)

AAV2rep78对HepG2细胞凋亡及信号转导途径的影响 

目的研究AAV2 rep78基因及其蛋白质产物对人肝癌细胞HepG2的凋亡及其途径的影响。 方法用脂质体转染法将AAV2 rep基因真核表达载体pCI/neo-Rep78瞬时转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pCI/neo的HepG2细胞为对照;分别抽提三组细胞总...
重庆医科大学  硕士论文  2007年 下载次数(51)| 被引次数(0)

未知基因KH的真核表达载体构建及其对细胞增殖的影响 

目的 构建未知基因KH的开放阅读框架 (KH ORF)的真核表达体系 ,初步探讨未知基因KH对细胞增殖的影响。方法 采用DNA重组技术构建KH ORF的表达载体pCI neo KH ORF ,通过脂质体法转染COS 7细胞和K5 6 2细胞 ,RT PCR检测目的基因的表达。采用流式细胞术检测KH ORF对COS 7细...
《中华肿瘤杂志》  2005年 第03期 下载次数(113)| 被引次数(3)

中国株HIV-1 gag基因核酸疫苗免疫小鼠的实验研究 

目的 研究开发针对我国人类免疫缺陷病毒 1(HIV 1)流行株的艾滋病治疗性疫苗 ,构建含中国流行株HIV 1核心蛋白(gag)基因的核酸疫苗 ,并评价其诱导的体液和细胞免疫反应效果。方法 将HIV 1gag基因插入到真核表达载体 pCI neo中 ,构建了真核表达质粒pCI neoGAG ,并经XbaⅠ/SalⅠ双酶...
《解放军医学杂志》  2004年 第05期 下载次数(94)| 被引次数(8)

转录因子环腺苷酸反应元件结合蛋白对宫颈癌细胞周期的调控及其机制研究 

背景意义宫颈癌是世界上常见的女性恶性肿瘤之一,严重威胁女性的身体健康。其发生发展是一个多因素参与、多基因改变及多阶段发展的复杂病变过程。新近研究发现,转录因子环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)介导的目的基因在肿瘤形成和发展过程中扮演重要角色。我们的前期研究结果发现,天花粉蛋白(TCS)诱导宫颈腺癌细胞凋亡的机制之一与...
宁波大学  硕士论文  2012年 下载次数(75)| 被引次数(0)

肝细胞生长因子对慢性肾衰竭肾脏保护作用的研究 

慢性肾衰竭(CRF)是严重影响人类健康的疾病,它是以肾小球硬化、肾间质纤维化的不断进展为特点,末期的治疗是血液净化及肾移植,给社会及家庭带来严重的负担。因此如何减慢CRF进展,减慢其发展至终末期肾衰竭的进程有重大的社会及经济效益。 5/6肾切除后的残余肾是研究慢性肾衰竭病理生理过程的常用且经典的实验动物模型。5/...
吉林大学  博士论文  2012年 下载次数(283)| 被引次数(5)

人肝细胞再生因子表达载体构建及抗肝纤维化作用 

各种因素所致的慢性肝脏损伤,都可能发生肝细胞炎症、坏死,进而发展成为肝纤维化或肝硬化,治疗上目前尚无理想的治疗方法。肝细胞生长因子(Hepatocyte Growth Factor HGF)作为一种多功能生长因子,是由肝脏的储脂细胞生成的一种具有强烈有丝分裂原活性的蛋白质,它不仅能够刺激原代鼠肝...
吉林大学  博士论文  2007年 下载次数(345)| 被引次数(1)

含沙门菌内源启动子新型双功能表达载体的构建及其在猪瘟病毒疫苗研究中的应用 

为适应以减毒胞内寄生菌为运载体的兽用基因疫苗研究发展趋势,研究构建含有减毒胞内寄生菌自身内源性诱导启动子的新型双功能基因疫苗表达载体,以增强基因疫苗诱导有效保护性免疫。基于以上考虑,本课题研究旨在研制含猪霍乱沙门菌内源性诱导启动子的新型双功能基因疫苗通用表达载体,既能够在运载体原核细胞中可调控表达携带抗原基...
四川农业大学  博士论文  2009年 下载次数(608)| 被引次数(6)

结核病Mtb8.4/hIL-12嵌合DNA疫苗的研究 

目的: 以IL-12作为分子佐剂,与结核杆菌新抗原Mtb8.4基因连接形成嵌合分子,将其克隆到真核表达质粒中,构建成嵌合DNA疫苗,研究其在小鼠体内诱导细胞免疫应答的效果及对C57BL/6N小鼠的免疫保护作用,为寻求安全、有效、廉价的结核病新疫苗打下基础。...
重庆医科大学  博士论文  2004年 下载次数(104)| 被引次数(0)

传染性法氏囊病毒粒子感染及其A节段编码基因转化细胞的转录本初步分析 

传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)侵染鸡法氏囊组织的B淋巴母细胞,导致严重的免疫抑制。为了探索IBDV感染及其编码基因转化对宿主细胞代谢的影响,本论文以Vero细胞为模型,利用LongSAGE技术(Long serial analysi...
浙江大学  博士论文  2006年 下载次数(273)| 被引次数(5)

一种肝脏高效表达调控序列及其应用 

本发明公开了一种肝脏高效表达调控序列及其应用,其目的是提供一种肝脏高效表达调控序列及其在肝脏中表达外源基因中的应用。该序列是含有肝脏特异性启动子AAT-1202-+45和增强子Aer及ApoE的表达调控序列。所述增强子Aer和ApoE在载体中位于启动子AAT-1202-+45的上游。本发明所提供的肝脏表达调控序列可调控...
中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所  中国专利  2005年 下载次数(0)| 被引次数(0)

视黄酸依赖反义cyclinD1 RNA表达载体的构建与鉴定 

目的 构建人细胞周期素D1(CyclinD1)基因的视黄酸 (Retinoicacid ,RA)依赖反义RNA表达载体 ,为进一步在细胞内应用视黄酸诱导其表达从而发挥效应的肿瘤基因治疗奠定基础。方法 运用DNA重组技术构建含有RARE3 TK启动子的反义cyclinD1RNA真核表达载体 (pCI neo RARE3 ...
《免疫学杂志》  2004年 第01期 下载次数(41)| 被引次数(1)

转录因子CREB在紫杉醇抗肿瘤活性中的作用及其分子机制研究 

背景意义近年来大量研究表明,cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response elementbinding protein, CREB)作为原癌性核转录因子,参与肿瘤发生发展过程。传统观点认为,细胞接受外界刺激后活化一系列酶联反应,通过转录因子CREB调控其靶蛋白的转录水平,从而调节细胞的增殖和凋亡过程。深入研究发...
宁波大学  硕士论文  2013年 下载次数(87)| 被引次数(0)

转染外源性白细胞介素6基因增强乳腺癌细胞株MCF-7表达肿瘤相关抗原 

目的 :探索白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )增强乳腺癌细胞表达乳腺癌抗原 (CA15 3)和癌胚抗原 (CEA)的作用。方法 :将含IL 6蛋白编码顺序1176bpcDNA插入Pci neo哺乳动物表达载体。将重组载体转染MCF 7乳腺癌细胞 ,采用ELASA方法测定细胞培养上清液内IL ...
《中国临床药理学与治疗学》  2004年 第12期 下载次数(61)| 被引次数(0)

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