枯草芽孢杆菌菌株改造、启动子优化和普鲁兰酶的高效制备研究 

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种被美国食品和药物管理局列为原则上认为安全的微生物(GRAS),并且具有较强的蛋白分泌能力,因此,被广泛用于外源蛋白的表达。本实验室前期工作中从自然界筛选得到了一株菌体生长及分泌蛋白性能优良的枯草芽孢杆菌,但它存在很多野生性状,不适合直接作为外源基因表达宿主菌。本研...
江南大学  博士论文  2018年 下载次数(408)| 被引次数(1)

菊芋乙醇发酵策略及菊粉酶表达调控机制研究 

生物能源能够缓解能源危机,促进人类的可持续发展。燃料乙醇已实现大规模的工业化生产,为全面推进能源结构转型奠定了基础。发展非粮作物乙醇是中国燃料乙醇的重要发展方向。菊芋以其耐寒、耐旱、抗风沙、繁殖力强、保持水土等生长特性,成为现阶段非粮作物乙醇的研究焦点。与淀粉质原料相比,菊芋乙醇发酵过程面临发酵时间长和残糖浓度高等难题...
大连理工大学  博士论文  2017年 下载次数(129)| 被引次数(2)

重组胆固醇氧化酶表达的发酵优化 

胆固醇氧化酶是一种重要的检测用酶,除广泛应用于医疗检测外,在食品开发、医疗保健、生物农药等方面也有应用潜力。鉴于微生物来源的胆固醇氧化酶表达量小且需要胆固醇诱导的问题,本实验室成功构建了一株可胞内表达胆固醇氧化酶的基因工程菌,但是胆固醇氧化酶主要以包涵体的形式存在,活性胆固醇氧化酶表达量低。本文采取调整诱导剂,优化发酵...
江南大学  硕士论文  2010年 下载次数(193)| 被引次数(5)

微生物转化法高效制备L-正缬氨酸及其关键酶的分子改造 

L-正缬氨酸是一种非蛋白质氨基酸,最早发现是枯草芽孢杆菌产生的天然抗菌肽的组成成分。目前,L-正缬氨酸的主要应用是作为关键的医药中间体,用于合成治疗各种高血压与充血性心力衰竭的药物培哚普利。L-正缬氨酸主要是依靠化学合成,直接合成手性纯的L-正缬氨酸会涉及到剧毒原料氰化物且收率低,不利于环境保护。生物催化剂由于严格的立...
江南大学  博士论文  2019年 下载次数(176)| 被引次数()

乳糖诱导脯氨酸羟化酶高效表达研究 

研究了乳糖诱导重组大肠杆菌表达脯氨酸羟化酶与L-脯氨酸生物转化。结果表明,将种子液按1%的比例接种于含有0.8%乳糖发酵培养基中,在28℃、140 r/m条件下,培养约2 h,在分光光度计波长为600 nm,OD值为0.6~0.8条件下,再诱导培养13 h,离心收集菌体,按质量体积比1 g∶100 m L(菌体量∶转化...
《煤炭与化工》  2018年 第07期 下载次数(63)| 被引次数()

基于融合自组装双亲短肽的酶分子改造 

自组装双亲短肽(Self-assembling amphipathic peptide,SAP)是一类由交替排布的亲疏水性氨基酸组成,在水溶液中可自发聚集形成纳米颗粒的短肽。前期研究表明,在脂肪氧合酶(Lipoxygenase,LOX)的N-端融合SAP可提高其表达量、稳定性和比酶活。为进一步提高其应用效率,本研究以来...
江南大学  博士论文  2019年 下载次数(60)| 被引次数()

响应面法优化表达丙酮酸氧化酶重组大肠杆菌培养基 

本研究利用响应面法优化重组大肠杆菌的培养基提高了其表达丙酮酸氧化酶的产量。首先,单因素优化实验表明pH、甘油浓度、酵母粉浓度、胰蛋白胨浓度分别为pH 7、0. 3%、1. 2%、0. 6%时有利于重组大肠杆菌表达丙酮酸氧化酶。进而,利用Box-Behnken法对甘油、酵母粉、胰蛋白胨设计三因素三水平实验,通过响应面回归...
《工业微生物》  2018年 第06期 下载次数(143)| 被引次数(2)

基因工程菌GS115-pPIC9k-ChiA 4.0发酵生产HaSNPV几丁质酶的研究 

几丁质酶(Chitinase)能够专一性的分解几丁质(Chitin),作为生物杀虫剂具有对人畜无害的优点。棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒(HaSNPV)是棉铃虫专一性病原微生物,通过分泌几丁质酶液化昆虫体壁,侵入体内抑制或杀死昆虫。本实验室近几年通过对HaSNPV几丁质酶基因重组、转化及表达的研究,旨在开发无...
西北大学  硕士论文  2010年 下载次数(153)| 被引次数(3)

粗糙脉孢菌C_2H_2突变株筛选及基因功能研究 

丝状真菌的木质纤维素水解酶基因在可溶性诱导物的诱导作用下表达,其表达水平取决于转录激活子和阻遏因子的共同作用。因此,挖掘、解析这些纤维素酶基因表达调控关键的转录因子对提高木质纤维素水解酶的产量具有重要的理论指导和实际应用意义。为了进一步挖掘调控纤维素酶表达的新型转录因子,本研究以粗糙脉孢菌锌指转录因子C2H2家族的57...
天津科技大学  硕士论文  2015年 下载次数(51)| 被引次数(0)

锰离子和N,N-二甲基甲酰胺诱导里氏木霉高产纤维素酶的机制研究 

里氏木霉(Trichoderma reesei)是具有优异蛋白表达能力、分泌能力的丝状真菌,是工业上生产纤维素酶的重要菌株,所生产的纤维素酶已经广泛应用在饲料、制浆造纸、纺织洗衣和生物能源等行业。因此,需要通过现代生物工程技术进一步提高纤维素酶的产量和降低纤维素酶的生产成本,以满足日益增长的商业化需求。此外,T.ree...
华东理工大学  博士论文  2019年 下载次数(83)| 被引次数()

sn-1,3专一性脂肪酶的筛选、重组表达和分子改造研究 

酶法合成母乳脂肪替代品是近年来的功能性油脂方面的研究热点,而sn-1,3专一性脂肪酶是其中的关键原料之一。然而,市场上sn-1,3专一性脂肪酶制剂非常有限且价格昂贵,需要在sn-1,3专一性脂肪酶的生产技术上获得突破,以获得低成本、高活力的脂肪酶制剂。本研究以提高sn-1,3专一性脂肪酶产量及降低其生产成本为目标,主要...
浙江大学  博士论文  2016年 下载次数(647)| 被引次数(2)

重组毕赤酵母表达米根霉(Rhizopus oryzae)脂肪酶的发酵调控及酶稳定性研究 

近几十年来,巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)已逐渐成为一种应用最为广泛的表达系统,受到学者们的广泛关注。这主要是因为它不仅是一种真核表达系统,其所包涵的强启动子醇氧化酶1(AOX1)可以促使菌体较快生长、达到较高的外源蛋白表达量,而且还因为其所使用的无机盐培养基成本低,外源蛋白可分泌的特点,使得大规模的...
江南大学  硕士论文  2013年 下载次数(241)| 被引次数(3)

匍枝根霉纤维二糖合成酶的鉴定与调控机制研究 

纤维素酶是一种由内切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(CBH)和β-葡萄糖苷酶(BG)组成的复合酶,三者通过协同作用完成纤维素到糖的转化过程。当前纤维素酶工业生产中,非纤维素碳源已逐渐取代传统纤维素碳源,广泛应用于诱导丝状真菌产酶。然而,关于非纤维素条件下纤维素酶诱导机制的研究报道几乎还是空白。本研究采用的匍枝根霉(Rh...
江南大学  博士论文  2018年 下载次数(101)| 被引次数()

重组大肠杆菌产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶分批补料发酵工艺 

为了获得低成本的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL),在5L发酵罐发酵中对工程菌E.coliBL21(DE3)/pET28b-TLL的分批补料发酵工艺进行研究。结果表明:以葡萄糖为碳源的补料培养基,采用溶氧(DO)反馈补料策略进行补料,当OD600=60时降温至28℃,分2次加入终质量浓度为30g/L乳糖进行诱导表达。优化...
《生物加工过程》  2015年 第02期 下载次数(135)| 被引次数(2)

基因工程酶法生产谷胱甘肽 

谷胱甘肽是一种重要的非蛋白巯基物质,在食品、化妆品和医药等领域得到了广泛的应用。本课题从经过基因工程法改造的重组菌出发,对参与体外合成GSH的谷胱甘肽双功能合成酶(GshF)和偶联ATP再生相关的多聚磷酸激酶(PPK)的表达方法进行了优化,并研究了杂蛋白表达较多的粗酶液的分离方法和分离特性。最后针对研究过程中包涵体现象...
北京化工大学  硕士论文  2016年 下载次数(260)| 被引次数(2)

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