应用全合成噬菌体抗体展示库技术实现抗膀胱癌单链抗体的定向进化 

单链抗体在肿瘤治疗的临床应用中常会遇到两方面的问题 ,即低亲和力和鼠源性导致的免疫原性。为此 ,我们对鼠源抗膀胱癌单链抗体进行人源化改造 ,并从噬菌体抗体库中筛选具有高亲和力的人源化的单链抗体分子。运用噬菌体展示技术 ,成功构建了库容为 10 6人源化的噬菌体抗体库 ,用膀胱癌细胞系膜抗原进行三轮筛选 ,得到了 2个结...
《高技术通讯》  2002年 第08期 下载次数(117)| 被引次数(3)

高亲和力抗膀胱癌单链抗体筛选及亲和力测定 

以膀胱癌细胞系BIU-87膜抗原为亲和底物,从抗膀胱癌噬菌体人源化单链抗体库中筛选出4个高亲和力改形单链抗体.ELISA结果和NH4SCN洗脱法数据显示,它们对膀胱癌细胞膜抗原的亲和活性显著高于鼠源单链抗体.同时以多种蛋白检验了其亲和作用的特异性.
《甘肃科学学报》  2009年 第02期 下载次数(146)| 被引次数(0)

从噬菌体抗体库中筛选出抗原结合活性相近、表达水平不同的单链抗体 

从抗人膀胱癌改形噬菌体抗体库中筛选出一组相对亲和力常数和细胞结合活性相近的单链抗体 ,而它们的结合活性均明显高于起始的鼠源单链抗体。在亲和力淘选的过程中 ,这一组抗体的表达量存在显著差异 ,这在一定程度上影响到筛选过程中ELISA鉴定的结果 ,使整个筛选过程并不仅仅是对高亲和力抗体的筛选 ,也同时得到了高表达量的抗体。
《高技术通讯》  2003年 第10期 下载次数(38)| 被引次数(1)

一种蛋白内含子介导纯化的原核表达载体的构建及应用 

蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件,它将插入前体蛋白的中间的蛋白质内含子(intein)剪切出来,并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链连接起来。在此过程中不需要辅酶或辅助因子的作用,仅需四步分子内反应。Intein 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用于蛋...
西北农林科技大学  硕士论文  2004年 下载次数(255)| 被引次数(1)

蛋白内含子介导纯化的表达载体的构建及应用 

抗膀胱癌单链抗体 (PG)融合在蛋白内含子 (intein)的C末端 ,利用intein的N末端具有的chitinbindingdomain(CBD)对几丁质柱的吸附特性及intein的自切割活性对PG进行一次性纯化。同时 ,引入大肠杆菌分子伴侣肽基脯氨酰顺反异构酶 (Fk pA)与目的蛋白进行共表达及融合表达 ,以...
《生物技术》  2004年 第04期 下载次数(213)| 被引次数(0)

抗人膀胱癌噬菌体单链抗体的初步制备 

应用PCR方法,从杂交瘤细胞中扩增鼠抗人膀胱癌抗体重、轻链可变区基因,经DNA接头连接后与噬菌粒pCANTAB5重组,转化大肠杆菌后制备噬菌体抗体文库,通过亲和筛选、再转染、克隆化及鉴定,得到高亲和力抗人膀胱癌噬菌体单链抗体。
《免疫学杂志》  1997年 第02期 下载次数(22)| 被引次数(7)

抗膀胱癌单链抗体基因在烟草中的表达 

抗膀胱癌单链抗体(scFv)基因为目的基因,构建植物表达载体,转化烟草,研究医用治疗性工程抗体基因在植物中的表达.结果表明,经Southern杂交鉴定出的转基因植株,叶片提取物的蛋白电泳有特异带出现,其分子量约为27 ku,同预期的单链抗体分子量一致,表达量最高的一株,抗体含量占可溶性蛋白的1.4%.竞争性抑制ELI...
《自然科学进展》  1999年 第06期 下载次数(33)| 被引次数(3)

抗人膀胱癌基因工程单链抗体的制备研究 

应用PCR方法,从分泌鼠抗人膀胱癌抗体的杂交瘤细胞中扩增抗体重、轻链可变区基因,经DNA接头连接后与噬菌粒pCANTAB5重组,转化大肠杆菌后,通过亲和筛选、再转染、克隆及鉴定,以此获得抗人膀胱癌噬菌体单链抗体。
《中华泌尿外科杂志》  1998年 第03期 下载次数(37)| 被引次数(0)

抗膀胱癌免疫毒素在大肠杆菌及烟草中的表达研究 

大肠杆菌是最常用的外源蛋白表达宿主,它以其遗传背景清楚,便于操作和成本低廉而在基因工程中广泛使用。但是在基因工程的实践中,大量表达的外源蛋白往往容易聚集成难溶的包涵体。这就需要复杂的变性复性过程,使其从无活性的聚集体状态恢复成为天然构象状态。同时人们发现在极端渗透压环境中,细菌能够通过摄取或者合成...
河北农业大学  硕士论文  2002年 下载次数(79)| 被引次数(0)