绿色荧光蛋白研究进展 

作为一种新型、方便的活性标记,来自水母的绿色荧光蛋白(GFP)正在多种原核和真核生物研究中应用。本文主要就GFP的光谱特性、GFP的稳定性、GFP的改进、GFP在植物中的应用以及GFP荧光的检测作一简要阐述。
蒋芳玲;杨国顺;刘志敏;谢丙炎 下载次数(1065)| 被引次数(37)

植物激素与雄性不育关系的研究进展 

从不同育性植物内源激素水平的差异、环境条件影响雄性育性过程中内源激素水平的变化和外源施用植物生长调节剂对雄性育性的影响等方面概述了植物激素与雄性不育发生关系的研究进展 ,并提出了今后研究工作的一些思路
何长征;萧浪涛;刘志敏;邹学校 下载次数(570)| 被引次数(45)

金银花名称本草考证 

金银花为常用中药,有关记载最早见于《肘后备急方》。因历史变革及地区习惯的不同,金银花的有关名称多且混乱,给本草学研究及临床应用带来了诸多不便。因此,将金银花各种名称进行本草学考证,以正本清源、澄清混乱,有着重要的现实意义。1金银花各种名称出现的朝代与...
张永清;王丽萍;刘志敏 下载次数(667)| 被引次数(58)

实验动物微机管理的设计与实现 

本文介绍了我院医学实验动物中心开发应用微机管理的设计目的、软件系统功能、结构、实现方法及技术特点。
梅世昌;李双良;刘志敏;吕思飞 下载次数(23)| 被引次数(3)

基因定位修复技术——嵌合修复术(chimeraplasty) 

传统的以病毒DNA为载体的基因治疗方法存在病毒导入的靶向性差、整合位点的特异性差、基因剂量的可控性差以及病毒载体具有一定的免疫原性的缺点 ,而实际上许多单基因遗传病只要将突变的单个碱基校正就能达到基因治疗的目的 ,不必置换或整合入整个基因 .嵌合修复术 (chimerplasty)是近年来迅速发展起来的一种基因定位修复...
欧阳立明;张嗣良;刘志敏 下载次数(109)| 被引次数(0)

大肠杆菌BL21(DE3)lpxM突变株的构建 

目的:lpxM基因失活可以产生极低内毒素活性的脂多糖。构建大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株,并考察该突变株的生长状态和表达重组蛋白的能力。方法:构建同源臂长500bp左右的打靶载体,借助Red同源重组系统,使E.coliBL21(DE3)的lpxM基因发生插入失活,再导入编码FLP位点特异性重组酶的质粒pCP...
张君;方宏清;谢达平;刘志敏;陈惠鹏 下载次数(406)| 被引次数(3)

逆转录病毒载体构建的hNT-3基因在大鼠成纤维细胞中的表达 

为了检验重组逆转录病毒对体外培养细胞的感染能力和效率 ,用逆转录病毒载体构建的人神经营养因子 3(pLXSN NT3)感染大鼠原代成纤维细胞 ,经G4 18筛选获得了稳定整合有外源hNT 3的工程细胞株 .RT PCR证实了外源基因hNT 3已整合到宿主细胞基因组 ,并可合成其mRNA ;PCR检测方法证明细胞株不含...
欧阳立明;周涛;薛冲;刘志敏;张嗣良 下载次数(54)| 被引次数(2)

人神经营养因子-3在哺乳动物细胞中瞬时表达和稳定表达的初步研究 

将人神经营养因子 - 3全长 c DNA克隆入真核表达载体 pc DNA3,分别在 COS- 7细胞和CHO细胞中获得了瞬时表达和稳定表达。经大乳鼠脊髓背根神经节测活 ,瞬时表达和稳定表达产物均能明显促进其神经突起的生长 ,瞬时表达量约为 1 0 -7g/m L,稳定表达量可达 1 0 -8g/m L
欧阳立明;周涛;薛冲;刘志敏;张嗣良 下载次数(46)| 被引次数(1)

人神经营养因子-3重组逆转录病毒的包装与鉴定 

在逆转录病毒载体pLXSN中引入人神经营养因子 3(hNT 3) ,构建成重组质粒pLXSN NT3,转染包装细胞PA317后经G418筛选得到几个稳定产毒的细胞克隆。测定这几个克隆的病毒滴度 ,最高达到 1 6 0× 10 5 ,且产毒细胞株不产生复制型病毒。PCR和大乳鼠背根神经节活性检测证明hNT 3已整合到宿...
欧阳立明;周涛;薛冲;刘志敏;张嗣良 下载次数(40)| 被引次数(1)

TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达 

根据烟草花叶病毒U1株系TMV-U1序列,人工合成引物,通过PCR扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系(TMV-B)的外壳蛋白(CP)基因和3′端非编码区.DNA全序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长459个碱基,编码151个氨基酸,3′端非编码区全长224个碱基.与TMV-U1株系相比,TMV-B仅在CP基因上有一个碱基缺...
刘勇;周雪平;李德葆;刘志敏 下载次数(42)| 被引次数(0)

植物转录因子的超表达及其在分子育种中的应用 

植物在生长发育过程中经常遭受到许多生物和非生物因素的胁迫,需要通过对基因的调控来适应,而转录因子在植物的生长发育和防卫反应的表达调控中有着非常重要的作用,因此需要对转录因子的功能进行深入的研究。为了研究转录因子的功能,一系列的反遗传学工具随之发展起来,包括超表达、反义抑制、基因敲除等,而最为普遍的则为基因敲除技术与超表...
张秋平;杨宇红;谢丙炎;刘志敏 下载次数(1053)| 被引次数(35)

巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展 

巴斯德毕赤酵母是一种近年来广泛使用的基因表达系统 ,它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等许多优点 .综述了该系统在载体类型、载体元件 (包括启动子、选择标记和信号肽序列 )、受体类型、以及提高整合拷贝数等方面的进展
欧阳立明;张惠展;张嗣良;刘志敏 下载次数(1122)| 被引次数(280)

分子伴侣及信号肽对毕赤酵母中分泌蛋白表达水平的影响 

目的:探索定位于细胞质、内质网膜及内质网腔中的分子伴侣及其组合对于带有不同信号肽的胞外β-1,3-葡聚糖酶(EXG1)在巴斯德毕赤酵母GS200中表达水平的影响。方法:通过融合PCR技术分别构建带有酵母α交配因子引导肽序列(αMF)、酵母α交配因子信号肽序列(αPre)和重链结合蛋白(Bip)信号肽序列的报告蛋白EXG...
杜济良;赵洪亮;薛冲;任敏;刘志敏 下载次数(531)| 被引次数(9)

不同信号肽对胞外β-(1,3)-葡聚糖酶在巴斯德毕赤酵母中表达的影响 

目的:在胞外β-(1,3)-葡聚糖酶成熟肽的N端添加不同类型的信号肽,研究不同信号肽对其在巴斯德毕赤酵母中表达水平的影响。方法:通过融合PCR方法将α成熟交配因子(MFα)、成熟交配因子Pre肽(αPre)和共翻译转运信号肽(Bip信号肽)等3种信号肽的DNA片段连接至胞外β-(1,3)-葡聚糖酶成熟肽基因的5′端,利...
杜济良;赵洪亮;薛冲;任敏;刘志敏 下载次数(339)| 被引次数(6)

人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达 

目的:在巴斯德毕赤酵母中表达有降糖活性的人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)突变体(2Gly-hGLP-1)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白。方法:为将GLP-1氨基酸序列第2位的丙氨酸(Ala)定点突变为甘氨酸(Gly),根据毕赤酵母偏爱密码子合成编码2Gly-hGLP-1的基因;采用重叠PCR法拼接2Gly-hG...
龙娟;薛冲;赵洪亮;杨晓红;刘志敏 下载次数(257)| 被引次数(4)

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